생물학 실험보고서 - DNA work
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작성일 24-04-01 10:44
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14. competent cell을 20ul에 지난주에 뽑았던 DNA를 1ng 넣었다.
15. 1초간 voltexing 하였다.
11. Washing bufferB 700㎕를 넣고 1분 원심분리하고 collection tube의 용액을 버렸다.
21. 준비해둔 DNA를 제한효소로 반응을 시켰다.
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설명
[생물학實驗보고서]
1. 實驗 題目(제목) : DNA work
2. 實驗 목적 : 세균의 세포벽을 파괴하고 plasmid DNA를 분리한다.
6. Neutralization buffer를 350㎕넣고 9~10회 inverting해주었다.
18. LB 배지에 Amp를 추가한배지와 추가하지 않은 배지를 구분하였다. 분리한 plasmid DNA를 형질전환을 시키고 배지에서 키운다.
7. 12,000rpm에서 10분간 원심분리하였다.
12. column을 E-tube에 옮기고 50㎕의 elution buffer를 넣은 후 1분간 incubation하였다.
3. 재료 :
-Echerichia coli(Competent cell : DH5α), plasmid DNA(pUC19 vector, 마이크로 피펫, 소형 원심분리기, E-tube, Ice, plasmid DNA purification kit, Resuspension buffer(50mM glucose, 25mM Tris·Cl (pH 8.0), 10mM EDTA (pH 8.0), RNase A), Lysis buffer(0.2N NaOH, 1% SDS), Neutralization buffer(5M potassium acetate, glacial acetic acid), competent cell, spreader, alcohol lamp, LA plate, water bath, DNA, restriction enzyme, enzyme buffer, 1kb marker, loading dye, 1xTAE buffer, agarose, EtBr, electrophoresis kit, gel 판, comb…(drop)4. 實驗과정
5. Lysis buffer를 250㎕넣고 5~6회 inverting해주었다.
24. 전자렌지에 2분 정도 돌린 후 식힌 다음 Etb
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실험과제/생물의학
다.
